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AMMS®PrimeCell 免疫细胞培养基
货号:AS-38
AMMS®PrimeCell 免疫细胞培养基-产品介绍
AMMS®PrimeCell 免疫细胞基础培养基是一种完全无血清 、无异种成分的培养基,由AMMS®PrimeCell 免疫细胞基础培养基和AMMS®PrimeCell 免疫细胞添加物组成培养基,专为CAR-T细胞工艺开发设计。适用于T细胞的激活、扩增和转导,支持高效的CAR-T细胞生产。 本培养基不含动物源成分,批次间一致性高,可显著降低血清带来的批次差异和污染风险。本产 品同样适用于其他的常规免疫细胞的体外培养如 DC 细胞、NK 细胞、CIK 细胞、巨噬细胞等。
AMMS®PrimeCell 免疫细胞培养基-产品组成
AMMS®PrimeCell 免疫细胞培养基-产品特点
无血清配方:完全无血清,避免血清批次差异和污染风险。
高效扩增:支持各种免疫细胞的体外高速扩增,提高免疫细胞产量。
优化转导:配方中特别添加了支持病毒转导的成分,提高 CAR-T 等细胞的转导效率。
稳定性高:经过严格的质量控制,确保批次间一致性。
支持使用 Dynabeads 磁珠、可溶性抗体和刺激抗体呈递细胞方案活化 T 细胞。
AMMS®PrimeCell 免疫细胞培养基-产品使用说明及注意事项(以CAR-T工艺为例)
AMMS®PrimeCell 免疫细胞培养基的配制:
1、AMMS®PrimeCell 免疫细胞添加物置于37℃水浴锅中至完全融化后立即拿出,直接使用或分装 储存于-20℃,避免反复冻融。
2、将 25mL AMMS®PrimeCell 免疫细胞添加物加到 500mL AMMS®PrimeCell 免疫细胞基础培养
基中,彻底混匀。
3、细胞培养过程中需添加细胞因子 IL-2(推荐浓度 200IU/ml),按实验需求加入。
T 细胞分选激活:
1、将复苏的 PBMC,取样计数并流式检测 CD3+T 细胞比例。
2、将 CD3+ T细胞与 CD3/CD28分选激活磁珠按 1:1 比例均匀混合。
3、25rpm孵育30min,磁力架分选。
4、分选后,去除上清,加入培养基,细胞密度调整为1-2×106 cells/mL。
5、置于37°C 、5%CO2培养箱中培养。
T 细胞扩增/CAR-T 细胞转导:
1、激活培养24小时后,CAR 载体(如慢病毒或逆转录病毒),混匀。
2、去除磁珠,调整细胞密度为1×106/ml。
3、继续培养,定期监测细胞状态和转导效率。
4、及时调整细胞密度为 0.5~1×106/ml(细胞密度调整为 0.5×106/ml,可以隔天计数补液;细胞 密度调整为1×106/ml 时,需要每天观察细胞状态,每天计数补液)。
收获 CAR-T 细胞:
1、转导后8~10天,细胞数量达到峰值时,可收获CAR-T 细胞。
2、通过离心或其他方法收集细胞,用于后续实验或治疗。
注意事项:
1、AMMS®PrimeCell 免疫细胞添加物在37℃水浴锅复融,复融后直接使用或分装储存于-20℃, 避免反复冻融;
2、配制成的完全培养基建议一周内使用完。