人
<2EU/mL
棕色液体
2~8℃
7个月
实验步骤
1.1 将人的PBMC细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中,取样计数,取1×10⁷个细胞至1.5mL EP管中,1500rpm,离心5min。
1.2 取80μL MaxSortin™细胞分选缓冲液(MS-BF)重悬细胞,加入20μL CD3分选磁珠,混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。
1.3 取MaxSortin™ L型分离柱(MS-CL01)放入MACS分选器 (130-090-976) 上,用1mL 细胞分选缓冲液润洗两次。
1.4 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出,加入1mL细胞分选缓冲液,1500rpm,5min离心,弃上清。
1.5 加入1mL 细胞分选缓冲液重悬,将样品加入L型分离柱中,待其自然流出后,分两次加入细胞分选缓冲液,每次加1mL,15mL离心管收集流出液。
1.6 待细胞分选缓冲液全部流出后,将L型分离柱从MACS分选器上取下,放到另一新的15mL离心管中,向L型分离柱中加入3mL 细胞分选缓冲液,用活塞将液体直接打出。
1.7 将装有收集液的15mL离心管放入水平离心机,1500rpm,离心5min。
1.8 离心完成后倒掉上清,取1mL 1×DPBS溶液重悬细胞,计数并进行流式检测。
1.磁珠与细胞孵育时需要彻底混匀,以提高分选效率。 2. 应用该产品去除分选CD3+细胞时,需适当加大磁珠用量。
纳米级 CD3分选磁珠可用于分选人CD3⁺T细胞,通过在磁珠上偶联抗人 CD3单克隆抗体,实现CD3⁺ 细胞的分选。